| 培養基名稱 | 改良卵黃瓊脂 |
|---|---|
| 英文名稱: |
Egg Yolk Agar, Modified |
| 培養基類型: | 鑒別培養基 |
| 產品目錄號: | M759 |
| 產品規格: |
250g，500g 50%卵黃乳液 另售 |
| 保存條件: | 密封，避光，2-30度，干燥處保存。 |
| 產品性狀: |
乳白色至黃色粉末。 黃色不透明凝膠。 |
| 注意事項: | 避免攝入、呼入、皮膚接觸。配制時在通風櫥中進行，戴口罩、手套、護目鏡。 |
| 相關產品: | 厭氧菌卵黃瓊脂 卵黃瓊脂 50%卵黃乳液 |
產品描述：
改良卵黃瓊脂（Egg Yolk Agar, Modified）被推薦作為非選擇性、加富和鑒別培養基，用于培養 、分離和鑒別梭狀芽孢桿菌和其它厭氧芽孢桿菌。
改良卵黃瓊脂工作原理
改良卵黃瓊脂培養基是由卵黃瓊脂培養基衍生而來的，基于卵磷脂酶、脂肪酶和蛋白酶活性對芽胞梭菌進行鑒別和分離。改良卵黃瓊脂培養基中含有卵黃乳液，可以檢測卵磷脂酶和脂肪酶活性。卵黃中的卵磷脂的降解導致菌落周圍產生乳白色沉降帶。脂肪酶水解卵黃中的脂肪，導致菌落表面產生彩虹色光澤。卵黃也能減弱有機過氧化物的毒性，避免后者的積累。脂肪酶活性可能會延遲，因此延長培養時間至1周再判斷脂肪酶活性。蛋白酶活性表現為菌落周圍產生透明帶。酪蛋白胨和大豆蛋白胨提供氨基酸和其它復雜的含氮化合物。酵母提取物提供B族維生素。維生素K和氯血紅素促進厭氧菌生長。半胱氨酸是還原劑，也是必需氨基酸。
改良卵黃瓊脂的用途：
改良卵黃瓊脂用于分離和鑒別梭菌和其它厭氧菌。
改良卵黃瓊脂配方與配制方法
| 培養基成分： | 含量/L |
|---|---|
| 胰蛋白胨 | 15.0 g |
| 氯化鈉 | 5.0 g |
| 大豆蛋白胨 | 5.0 g |
| 酵母提取物 | 5.0 g |
| L-半胱氨酸 | 0.4 g |
| 氯高鐵血紅素 | 0.005 g |
| 瓊脂 | 20.0 g |
| 最終pH | 7.0 ± 0.2 |
配制方法：
1. 稱取50.4g本產品，加900ml去離子水，加熱使其溶解。
2. 分裝成90ml到合適容器中。
3. 121度高溫蒸汽滅菌15分鐘。
4. 冷卻至45-50°C時加入10ml預熱的 50%卵黃乳液 和1ml 維生素K1。混勻后倒平板。
實驗方法
1. 在接種前，從冰箱中取出培養基，使其恢復到室溫。
2. 培養基必需放在厭氧容器中還原18-24h。
3. 接種培養24-72h后的純培養物。劃線分離。
4. 接種后立即將平板倒置，放在厭氧容器中。35-37ºC，培養48-72h。
5. 培養48h后觀察平板上的卵磷脂酶、脂肪酶和蛋白酶活性。不要過早定論陰性結果，必需在培養7天后再做結論。
如果臨床樣本中疑似有梭菌，經過革蘭氏染色，觀察到廂型細胞，可以直接做Nagler 試驗。
結果與分析
卵磷脂酶：
卵磷脂酶陽性結果表現為菌落周圍有白色，不透明區域，向培養基中擴散。
卵磷脂酶陰性結果表現為菌落周圍無白色不透明帶。在讀取卵磷脂酶陰性結果時要與空白平板對照，因為卵磷脂酶可能會分散到整個培養基中，使得讀取十分困難。
脂肪酶：
脂肪酶陽性結果表現為：當光線以不同角度照射到平板上時，菌落表面有彩虹色的光澤。
脂肪酶陽性結果表現為：菌落表面無以上彩色油膜。
蛋白酶活性：
蛋白酶陽性結果表現為菌落周圍有透明區。
蛋白酶陰性結果表現為缺少以上現象。
標準菌株 生長情況 lecithinase lipase 產氣莢膜梭菌 ATCC13124 生長 + - 產芽胞梭狀芽胞桿菌 ATCC11437 生長 - + 脆弱擬桿菌 ATCC25285 生長 - -
